1999年，馬國明參演首部商戰劇《創世紀》，開啟個人的演繹生涯；同年，參演古裝探案劇《洗冤錄》。
2000年，被TVB第十四期藝員訓練班錄??；童年，客串古裝武俠劇《碧血劍》和古裝穿越情感劇《尋秦記》。2002年，出演時裝航空《沖上云霄》飾演Billy，并客串古裝神話劇《天子尋龍》和古裝情感劇《再生緣》等多部影視劇。
2005年，主演古裝偶像劇《西廂奇緣》。2006年，憑借古裝傳奇劇《本草藥王》中龐憲一角獲得萬千星輝頒獎禮飛躍進步男藝員獎；同年，參演《女人唔易做》和《愛情全?！?，分別飾演高志力和郭富勤。
2007年，在律政劇《律政新人王2》中飾演辛萬軍，這是馬國明首次擔任男主角并在臺慶中憑借”MK“一角入圍萬千星輝頒獎禮最受觀眾喜愛的男角色獎；同年，參演《十月初五的月光》和《師奶兵團》。
2008年，馬國明在時裝劇《甜言蜜語》中擔任男主角梁啟言；同年，古裝武俠愛情劇《少年四大名捕》播出，他在中飾演男主之一的鐵手；隨后，主演探案喜劇《古靈精探》和《太極》；同年，客串《師奶股神》和《尖子攻略》。
2009年，馬國明與鄭嘉穎、元秋、楊怡、李詩韻等人出演民初武俠劇《鐵馬尋橋》，在劇中飾演身患哮喘的武師顧汝棠，該角色入圍“萬千星輝頒獎禮觀眾最喜愛男角色”。
2010年，由馬國明、林峰、楊怡等 主演的《談情說案》播出，飾演風流倜儻、多情正義的高級督察lo sir；同年在臺慶劇《公主嫁到》中扮演小官媒。
2011年，馬國明在《女拳》飾演大漢奸游三水以及在《紫禁驚雷》中飾演奸角裕親王。
2012年2月，醫務劇《On Call 36小時》播出，飾演神經外科醫生張一健，該劇大結局單集平均收視37點，最高39點，馬國明憑借該劇獲得2012年萬千星輝頒獎禮我最喜愛的電視男角色獎和2012年MY AOD 我的最愛TVB劇集頒獎典禮我的最愛電視男主角獎；7月，穿越劇《回到三國》播出，飾演司馬信；10月，民國劇《名媛望族》播出，飾演鐘啟燊。
2013年2月，在單元劇《戀愛季節》（冬之章）中飾演朱祖安；7月，航空劇《沖上云霄II》播出，飾演副機長高志宏；11月，醫務劇《On Call 36小時Ⅱ》播出，憑此獲得2013年萬千星輝頒獎禮藝人眼中的視帝獎。
2014年6月，武俠劇《寒山潛龍》播出，飾演都尉朱長勝；12月，古裝輕喜劇《宦海奇官》播出，飾演縣官杜振鋒。2015年，在《梟雄》中飾演青年喬傲天，此劇榮獲2015年萬千星輝頒獎典禮最佳劇集。
2016年4月，參演的《廉政行動2016》播出；5月，網絡電影《愛情來的時候2》（德國篇）播出；8月，偵探喜劇《為食神探》播出，飾演偵探社調查員楊得基；12月，民初喜劇《流氓皇帝》播出，飾演朱錦春。
2017年10月，主演TVB靈異劇《降魔的》，在劇中飾演從小被收養的出租車司機馬季。2018年5月21日，飾演的古裝電視劇《宮心計2：深宮計》播出，劇中飾演對李隆基忠心耿耿的龍武軍中郎任三恕。
2019年，主演醫療劇《白色強人》，在劇中飾演的醫生唐明給觀眾留下深刻印象，馬國明憑借這一角色首次獲得TVB最佳男演員的稱號；隨后，主演的刑偵劇《飛虎之雷霆極戰》在優酷視頻獨播。
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