1999年在電影《公雞打鳴，母雞下蛋》中閆妮主演女村長，這是她第一次出演女一號(hào)，導(dǎo)演尚敬從中看到了閆妮的喜劇才華，請她客串了《炊事班的故事》。
2003年，尚敬執(zhí)導(dǎo)電視情景輕喜劇《健康快車》，閆妮在其中出演了兩個(gè)角色，其中一角為護(hù)士嚴(yán)文秀。
2005年拍攝的一部情景喜劇《武林外傳》使閆妮迅速地被全國觀眾認(rèn)識(shí)和喜愛。
2007年，出演電視劇《大明王朝1566》，閆妮在劇中飾演知書達(dá)禮的裕王李妃。
2009年一部火爆大江南北的《北風(fēng)那個(gè)吹》，一個(gè)唯一被載入中國電視劇歷史年鑒的女性角色――牛鮮花，讓閆妮兩年之內(nèi)獲六大電視劇盛典最高獎(jiǎng)項(xiàng)，并獲中國電視劇飛天獎(jiǎng)和金鷹獎(jiǎng)。
2009年，主演張藝謀導(dǎo)演的電影《三槍拍案驚奇》，閆妮在片中飾演風(fēng)情萬種卻有智謀有膽量，敢愛敢恨的老板娘；2010年閆妮憑借這部電影走上柏林電影節(jié)的紅地毯。這部影片是2009年最受大眾關(guān)注的華語電影，影片極具爭議與賣座。2009年3月19日，主演的首部反映中國三峽大移民的電視劇《國家行動(dòng)》開播，閆妮在劇中飾演峽江縣縣委書記向云秀；12月28日，出演的電視劇《鐵齒銅牙紀(jì)曉嵐4》開播，閆妮在劇中飾演格格葛松兒。
2010年1月2日，主演的國內(nèi)首部工業(yè)題材劇《奠基者》開播，閆妮在劇中飾演將軍余秋里的夫人劉素閣；2月21日，主演的都市生活輕喜劇《三七撞上二十一》開播，閆妮在劇中飾演鄧佑真；4月15日，主演的電視劇《張小五的春天》開播，閆妮在劇中飾演有勇有謀有情有義的女包工頭張小五；6月14日，主演的國內(nèi)首部反映刑滿釋放人員生活的現(xiàn)實(shí)題材電視劇《永不回頭》開播，閆妮在劇中飾演刑釋人員王朝東的妻子何麗萍 。同年主演大型綠色家庭情景喜劇《樂活家庭》和《樂活家庭2》，閆妮在劇中飾演知性達(dá)觀、才貌雙全的小區(qū)咖啡店老板娘。
2011年，主演電影版《武林外傳》，閆妮在片中飾演風(fēng)情萬種的女掌柜佟湘玉；主演港式喜劇《最強(qiáng)喜事》，閆妮在劇中飾演時(shí)尚化妝品公司的總監(jiān)Dream ；主演電影《畫壁》，閆妮在片中飾演外剛內(nèi)柔的仙境中女兒國的統(tǒng)治者“姑姑”；主演新春賀歲巨制電影《大魔術(shù)師》，閆妮在片中飾演劉青云的三姨太，在“戲中戲”里，一人分飾兩角。電影均取得了過億的票房佳績，閆妮被媒體評為華語影壇性價(jià)比最高的演員之一。出演古裝武俠巨制《楚留香傳奇》；主演青春魔幻喜劇《開心魔法》，飾演的是排球“魔鬼教練”劉華麗。
2012年，主演都市情感劇《親愛的》，閆妮在劇中飾演印刷廠“廠花”李寶莉，并且首次挑戰(zhàn)30年齡跨度；同年主演電視劇《煮婦也瘋狂》，閆妮在劇中飾演熱心善良、性格直爽的都市時(shí)尚美女大廚阿琴；同年主演電影《形影不離》，閆妮在片中飾演嫵媚性感的御姐領(lǐng)導(dǎo)陽總；同年主演大型革命戰(zhàn)爭劇《女子軍魂》，閆妮在劇中飾演個(gè)性彪悍的八路軍營長凌鳳俠；同年客串情景喜劇《大學(xué)生士兵的故事2》，閆妮在劇中飾演的衛(wèi)生隊(duì)心理醫(yī)生。
2014年3月19號(hào)，主演的電視劇《一仆二主》開播，閆妮在劇中飾演事業(yè)成功的女總裁唐紅，該劇占據(jù)衛(wèi)視電視劇收視排行榜冠軍；5月22日，主演的現(xiàn)實(shí)主義都市情感大戲《生活啟示錄》開播，閆妮在劇中飾演開朗率真的于小強(qiáng)。創(chuàng)造了2014年最高收視率2.387%，截至4月3日，網(wǎng)上播放量累積超過7億次。截至4月7日，網(wǎng)絡(luò)播放量11.6億，截至5月24日，網(wǎng)絡(luò)播放量20.48億。6月6日，主演電影《瘋狂72小時(shí)》上映，閆妮在片中飾演了繼承千萬古董家產(chǎn)的女土豪兼女神經(jīng)病許三娜。
2015年4月2日，主演的諜戰(zhàn)懸疑劇《王大花的革命生涯》開播，閆妮在劇中飾演由樸實(shí)“村花”成長為一名合格的女戰(zhàn)士，造型百變的“臥底女特工”的王大花；5月27日，主演的都市情感喜劇《前夫求愛記》開播，飾演不婚主義律師鮑小蕾；7月15日，主演的奇幻爆笑巨制《捉妖記》上映，飾演多年求子不得的老板娘駱冰；9月29日，主演的青春熱血軍旅偶像大劇《青春集結(jié)號(hào)》開播，閆妮在劇中飾演心理醫(yī)生閆教員。
2016年，參加央視猴年春晚，并表演了開場歌舞《春到福來》；2月1日，主演的賀歲電影《過年好》上映，閆妮飾演事業(yè)型女強(qiáng)人李羊朵；5月12日，主演都市情感經(jīng)偵大劇《愛的追蹤》開播，閆妮在劇中飾演歷經(jīng)商海浮沉而霸氣橫生的女強(qiáng)人文皓；6月29日，主演電影《反轉(zhuǎn)人生》上映，閆妮在片中飾演CBD土地娘上官芙蓉；9月8日，主演的都市家庭電視劇《太太萬歲》開播，閆妮在劇中飾演事業(yè)型女性葉舒心；12月16日，參演的電影《羅曼蒂克消亡史》上映，閆妮在片中飾演一個(gè)亂世上海很有腔調(diào)的管家“王媽”；12月30日，主演的喜劇電影《情圣》上映，閆妮在片中飾演熱情似火的美艷霸道女總裁馬麗蓮。
2017年，主演愛情電影《美容針》，閆妮在片中飾演知性的人氣女作家李棠珍；7月2日，出演的年度情感治愈大劇《復(fù)合大師》開播，閆妮在劇中飾演擁有多重身份的顧小意；7月26日，主演軍旅戰(zhàn)爭題材電視劇《絕密543》開播，閆妮在劇中飾演司務(wù)長馬老柴的妻子趙盈秋。
2018年5月11日，主演的電影《迷妹“羅”曼史》上映。9月，受邀參加2018年中央廣播電視總臺(tái)中秋晚會(huì)。10月，與靳東、陳曉、黃志忠、秦嵐、趙立新等主演由沈嚴(yán)、劉海波聯(lián)袂執(zhí)導(dǎo)的電視劇《人民的財(cái)產(chǎn)》。
2019年2月4日，2019年中央廣播電視總臺(tái)春節(jié)聯(lián)歡晚會(huì)，閆妮與周一圍、吳海龍、張維威、沈月、李棟、李佳旭表演小品《辦公室的故事》。 6月9日，領(lǐng)銜主演的都市家庭劇《少年派》登陸湖南衛(wèi)視金鷹獨(dú)播劇場播出。9月24日，由李少飛執(zhí)導(dǎo)的電視劇《我待生活如初戀》官宣，閆妮在劇中飾演蔡素芬，與張嘉譯繼《少年派》后再度合作。
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