2003年，還在杭州藝校上學(xué)的葉祖新被選中出演《情斷上海灘》而進(jìn)入演藝圈。
2005年，參演古裝電視劇《李小環(huán)與苗翠花》，飾演方世玉；同年，參演古裝宮斗電視劇《大清后宮》，飾演少年道光帝。2006年參演家庭倫理電視劇《死去活來(lái)》，飾演樊濤；參演古裝歷史電視劇《皇上二大爺》，飾演趙金山。
2008年，參演戰(zhàn)爭(zhēng)歷史電視劇《父親的戰(zhàn)爭(zhēng)》，飾演彭龍。
2009年，參演古裝歷史電視劇《楊貴妃秘史》，飾演韋堅(jiān)； 同年參演家族斗爭(zhēng)電視劇《大管家》，飾演李復(fù)修；參演戰(zhàn)爭(zhēng)歷史電視劇《內(nèi)線》，飾演蘇子童。2010年，參演古裝歷史電視劇《大唐女巡按》，飾演歐陽(yáng)；參演古裝神話電視劇《活佛濟(jì)公2》，分飾必清、瘦仙童兩角；參演尋親電視劇《杜鵑的女兒》，飾演小吳。
2011年，參演穿越電視劇《步步驚心》，飾演十爺；參演古裝搞笑電視劇《怪俠歐陽(yáng)德》，飾演淳貝勒。
2012年，參演愛(ài)情勵(lì)志電視劇《錯(cuò)點(diǎn)鴛鴦》，飾演冷剛；參演傳奇抗戰(zhàn)題材電視劇《五臺(tái)山抗日傳奇之女尼排》，飾演任松良；參演古裝歷史電視劇《薛平貴與王寶釧》，飾演葉公公；參演戰(zhàn)爭(zhēng)歷史電視劇《向著勝利前進(jìn)》，飾演何醫(yī)生；參演古裝武俠電視劇《新白發(fā)魔女傳》，飾演辛龍子；在古裝歷史傳奇電視劇《隋唐英雄》中飾演裴元慶。
2014年，參演古裝神話電視劇《歡天喜地俏冤家》，飾演高富帥；參演都市愛(ài)情電視劇《步步驚情》，飾演JACK；參演古裝搞笑愛(ài)情電視劇《犀利仁師》 ，飾演范大同；參演都市愛(ài)情電視劇《說(shuō)好的幸福》，飾演許諾；參演古裝歷史傳奇電視劇《隋唐英雄4》，飾演薛丁山。
2015年1月，參演《蜀山戰(zhàn)紀(jì)之劍俠傳奇》，飾演醫(yī)術(shù)不凡的張餡餅；8月參演的抗日電視劇《鐵在燒》在浙江、安徽衛(wèi)視播出，飾演走上歧路悲劇收?qǐng)龅亩〕笸蓿?月主演的愛(ài)情喜劇電影《窮途》上映，飾演前往苗寨尋找藥方的男主角鄒孝宇；參演都市情感電視劇《愛(ài)情萬(wàn)萬(wàn)歲》，飾演為愛(ài)癡狂的90后新新人類金波；11月參演莊園愛(ài)情電視劇《我們的秘密》，飾演為情所苦的造型師羅仁；11月與黃世超、楊世瀚、張思帆共同演唱的電視劇《蜀山戰(zhàn)紀(jì)》片尾曲《我就是我》單曲發(fā)布。12月主演民國(guó)動(dòng)作懸疑電視劇《左眼詭事》，飾演左眼能看到鬼魂的男主角尹明涯。
2016年，8月參演都市劇《一粒紅塵》，飾演癡情的酒吧老板閔朗。12月，主演的青春勵(lì)志偶像劇《食全食美》開(kāi)機(jī)，飾演男主角打假衛(wèi)士吳佑。
2017年3月31日，參演的懸疑電影《嫌疑人X的獻(xiàn)身》在中國(guó)大陸上映，飾演破案的線索人物羅淼警官。
2018年9月17日，參演的現(xiàn)代劇《橙紅年代》播出，飾演正義青年貝小帥。
2019年8月，參演電視劇《我們的西南聯(lián)大》。
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