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1989年，于慧主演楊延晉執導的劇情電影《地獄·天堂》，在片中飾演身世坎坷的靜玲。同年在黃蜀芹執導，陳道明、呂麗萍主演的電視劇《圍城》中飾演汪太太。

1990年，于慧在劇情電影《喋血金蘭》中飾演戲院名伶祁曼苓；同年在史蜀君執導的劇情《燃燒的婚紗》中飾演費家世交夏元善的女兒夏若青。

1991年，于慧搭檔祝延平主演石曉華執導電影《情灑浦江》。

1993年，搭檔張光北、于小慧主演劇情電影《血染桃花水》，在片中飾演林海雪原中的完達部落寡婦磧的寡婦。同年與許還山、王志文主演民國劇《大屋的丫環們》，令廣大電視觀眾認識。

1994年，在陳家林執導，劉曉慶、陳寶國主演的古裝歷史劇《武則天》中飾演唐高宗李治的妃嬪蕭淑妃。

1996年，再次與導演陳家林合作，出演其執導的歷史劇《漢武帝》飾陳皇后。同年與楊童舒主演電視劇《葉赫那拉公主》。與陳道明、葛優 合作主演《上海人在東京》同年憑借主演的農村題材電影《喜蓮》獲得第3屆中國電影華表獎最佳女演員、第17屆中國電影金雞獎最佳女主角 、第19屆小百花獎優秀女主角獎以及第6屆中國電影表演藝術學會金鳳凰獎。

2001年，與蓋麗麗、廖京生聯合主演都市生活劇《生活秀》飾來雙揚。在陸劍民 、王志飛主演的軍旅題材劇《導彈旅長》中飾演林靜。與趙燕國彰主演葉鴻偉執導的經典警匪懸疑劇《插翅難逃》。

2002年，憑借主演孫沙執導的劇情電影《巧鳳》獲得第8屆中國電影華表獎優秀女演員獎。

2006年，與薩日娜、丁海峰、顏丙燕主演農村題材電影《心靈的天空》，在片中飾演基層的女性計劃生育工作者。

2007年，在李萬年、曹翠芬主演的家庭倫理劇《老伴》中飾演馬丙坤的四閨女馬建秋。同年與李穎聯合主演家庭情感劇《灑滿陽光的小院》，在劇中飾演建筑設備機械廠職工韓素云。

2008年，主演闞衛平導演，高滿堂編劇的作品《金達萊》，憑借該劇摘得了第三屆新農村電視藝術節最佳女主角獎

2009年，主演根據黃步千的小說《濠河人家》改編的電視電影《濠河邊上的女人》。

2010年，主演的人物傳記劇《趙丹》在中央八套播出，并隨著導演翟俊杰、主演邢岷山做客《今夜有戲》。

2011年，領銜主演張曉春執導的抗日戰爭劇《母子情仇》，在劇中飾演土匪劉和尚 的壓寨夫人田彩霞。3月參與朱雨辰、馬蘇主演的婚姻情感劇《小夫妻時代》，飾演戴可可的母親楊惠玲。

2012年，搭檔孫海英主演鄉村倫理劇《陽光路上》，在劇中飾演善良堅韌、潑辣進取的梨樹村普通農民柳春香。

2016年，憑借盛林、李勇導演的電影《遙遠的約定》奪得47屆美國納什維爾國際電影節最佳女主角。